Programa de Pós-graduação em Farmacologia

FSL 831 - Métodos bioquímicos e moleculares em farmacologia - M/D

Carga horária: 30 h (2 créditos)
Prof. Dr. Mauro Schneider Oliveira

Objetivos: Propiciar informações sobre várias técnicas bioquímicas e de biologia molecular utilizadas em estudos na área de farmacologia. Desenvolver habilidades para operacionalizar protocolos bioquímicos e de biologia molecular na pesquisa em farmacologia.

Ementa: Estudo das técnicas bioquímicas e de biologia molecular destinadas a investigar os mecanismos de ação de drogas e outros mediadores químicos.

Metodologia e/ou instrumentos de ensino: Seminário individual, discussão de artigos científicos, aulas expositivas e práticas, quadro, equipamento audiovisual.

Forma de avaliação: Prova escrita, seminários, participação em aulas.

Programa:

Unidade 1 – Métodos bioquímicos em farmacologia.
1.1. Métodos com uso de radioligantes: união específica, captação e liberação de neurotransmissores.
1.2. Métodos com uso de sondas fluorescentes e biosensores óticos.
1.3. Métodos de determinação de atividades enzimáticas.
1.4. Centrifugação diferencial para separação de estruturas celulares.

Unidade 2 – Métodos moleculares em farmacologia.
2.1. Métodos para análise quantitativa dos níveis de DNA, RNA e proteínas específicas.
2.2. Clonagem de receptores e mutações sítio-dirigidas.
2.3. Transgenia, knockout, knockdown, transfecção heteróloga.

Bibliografia:

Livros:
1. Alberts B, Bray D, Lewis J, Raff M, Roberts K, Watson JD. Molecular Biology of the Cell, 3a Ed. Garland Publishing: E.U.A., 2003.
2. Kenakin T. Molecular Pharmacology. Blackwell Science: EUA, 1999.
3. Vogel H (Ed.). Drug Discovery and Evaluation: Pharmacological Assays. 2a Ed. Springer-Verlag: Alemanha, 2002.

Artigos científicos:

1. Cooper MA. Optical biosensors in drug discovery. Nat Rev Drug Discov. 1: 515-528, 2002.
2. Shinohara H, Wang F, Hossain SM. A convenient, high-throughput method for enzyme-luminescence detection of dopamine released from PC12 cells. Nat Protoc. 3:1639-1644, 2008.
3. Forrester MT, Foster MW, Benhar M, Stamler JS. Detection of protein S-nitrosylation with the biotin-switch technique. Free Radic Biol Med. 46:119-126, 2009.
4. Belzacq-Casagrande AS, Martel C, Pertuiset C, Borgne-Sanchez A, Jacotot E, Brenner C. Pharmacological screening and enzymatic assays for apoptosis. Front Biosci. 14:3550-3562, 2009.
5. Cozzi J, Anegon I, Braun V, Gross AC, Merrouche C, Cherifi Y. Pronuclear DNA injection for the production of transgenic rats. Methods Mol Biol. 561:73-88, 2009.
6. de Araújo ME, Huber LA, Stasyk T. Isolation of endocitic organelles by density gradient centrifugation. Methods Mol Biol. 424:317-331, 2008.