Imunologia

ELISA - Enzimaimunoensaio (Enzime-linked Immunosorbent Assay)

Desenvolvido nos anos 70 e muito difundido comercialmente a partir dos anos de 1985 com o ensaio para anticorpos anti-HIV, o ensaio ELISA é o mais comumente utilizado nos laboratórios e baseia-se na imobilização de um dos componentes, antígeno ou anticorpo, em fase sólida, e na utilização de um conjugado, que também pode ser Ag ou Ac, ligado a uma enzima, com a preservação da atividade enzimática e imunológica. Como o substrato forma um produto colorido, a alteração de cor é monitorada visualmente por meio de um espectrofotômetro, que determina a relação entre a intensidade da cor e a quantidade do que está sendo analisado na amostra.

O ensaio imunoenzimático ELISA apresenta:

1. elevadas sensibilidade e especificidade;
2. rapidez e baixo custo;
3. objetividade de leitura;
4. possibilidade de adaptação a diferentes graus de automação.

O teste é empregado para a detecção de antígenos ou anticorpos em um grande número de sistemas. A eficiência do teste depende da padronização adequada de cada uma das etapas e reagentes do teste. Concentração ideal de cada um dos componentes, tempo de incubação, concentração iônica e protéica e o pH do meio são os principais fatores que definem a eficiência do teste. A simples modificação do lote de um sal utilizado em alguns dos diluentes pode requerer a revalidação de todas as etapas do ensaio, para garantir a reprodutibilidade do teste.